核酸凝胶染料使用中需要注意的一些问题
核酸凝胶染料是目前市场中灵敏的凝胶核酸染料
稳定性*
可以使用微波炉加热,可以在室温下保存
更安全
试验结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB)
广泛的适应性
适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色
核酸凝胶染料染色过程简单
与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗
对DNA和RNA的迁移影响极小
对核酸迁移的影响小
核酸凝胶染料注意事项:
(1)此方法染色染料用量相对较少。500μL染料大约可以做100块50mL的胶。
(2)由于SolargelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将SolargelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。gelred兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
(3)如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
(4)此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。